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病毒類樣品凍干方法介紹

更新時(shí)間:2022-05-20 點(diǎn)擊次數(shù):1679

病毒是一種個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只含一種核酸DNA或RNA,必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型生物。病毒是一種非細(xì)胞生命形態(tài),它由一個(gè)核酸長(zhǎng)鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成,病毒沒(méi)有自己的代謝機(jī)構(gòu),沒(méi)有酶系統(tǒng)。因此病毒離開了宿主細(xì)胞,就成了沒(méi)有任何生命活動(dòng)、也不能獨(dú)立自我繁殖的化學(xué)物質(zhì)。它的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、和轉(zhuǎn)譯的能力都是在宿主細(xì)胞中進(jìn)行,當(dāng)它進(jìn)入宿主細(xì)胞后,它就可以利用細(xì)胞中的物質(zhì)和能量完成生命活動(dòng),按照它自己的核酸所包含的遺傳信息產(chǎn)生和它一樣的新一代病毒。

冷凍干燥(Lyophilization)全稱真空冷凍干燥,簡(jiǎn)稱凍干,是在低溫減壓條件下,利用水的升華使制品低溫脫水而達(dá)到干燥的一種技術(shù)。凍干在低溫低氧條件下進(jìn)行,多數(shù)生物反應(yīng)停滯,且處理過(guò)程無(wú)液態(tài)水存在,使物料原有結(jié)構(gòu)和形狀得到大程度的保護(hù)。通過(guò)凍干獲得的粉體硬團(tuán)聚少,粒徑小且均勻,已經(jīng)成為制備生物制品,尤其是蛋白多肽類粉針劑的一種重要方法。

保護(hù)劑一般采用脫脂牛奶或血清、人血白蛋白、蔗糖、海藻糖、山梨醇、甘露醇等糖和多元醇類,HES淀粉、明膠、右旋糖苷、緩沖鹽等。保護(hù)劑的作用機(jī)理是在冷凍干燥的脫水過(guò)程中穩(wěn)定病毒結(jié)構(gòu),防止細(xì)胞膜受冷凍或干燥而造成損傷。真空凍干病毒比較穩(wěn)定,可于室溫短期保存, 4~8℃長(zhǎng)期保存。此法綜合利用了各種有利于毒種保存的因素,具有成活率高,變異性小等優(yōu)點(diǎn),是常用的較理想的毒種保存方法之一。病毒疫苗凍干主要關(guān)注的是凍干后病毒滴度、殘余水分、熱穩(wěn)定性、抗原性及相關(guān)免疫實(shí)驗(yàn)。診斷不同的病毒毒株的特點(diǎn)采用不同的凍干保護(hù)劑組合進(jìn)行凍干,凍干工藝曲線根據(jù)混合液體的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度、塌陷溫度、共晶點(diǎn)溫度、共融點(diǎn)溫度等特點(diǎn)進(jìn)行相應(yīng)的預(yù)凍溫度,預(yù)凍時(shí)間,預(yù)凍工藝,升華干燥溫度,升華干燥時(shí)間,升華工藝及解析工藝的相關(guān)設(shè)計(jì)。任何物質(zhì)的成功凍干都離不開好的配方保護(hù)劑和相應(yīng)的凍干曲線。我公司可以提供相應(yīng)的凍干工藝曲線及凍干配方開發(fā)服務(wù)。


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